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乳、乳制品及饲料中三聚氰胺的检查实验

本专门的学问适用于水溶化肥、复混化肥、掺混养料、配方化肥中脱落酸、萘乙酸、氯吡脲、烯效唑的检验。  一、标准性引用文件  《GB/T
6682 剖析实验室用水标准和尝试艺术》  二、仪器:  1、高效液相色谱仪:配有三极管阵列车检查测器和色谱数据管理机。  2、微量注射器:50
μL。  3、漩涡混合器。  4、高速离心机:最高转速十分大于6 000
r/min。  5、解析天平:精度0.1
mg。  6、超声波清洗器。  7、金属试验筛:0.5
mm。  8、有机相微孔滤膜:0.22
μm   三、液相色谱操作准则  推荐的液相色谱条件如下:  aState of Qatar色谱柱:250
mm×4.6 mm(i.d.卡塔尔不锈钢柱,内装C18、 5.0
μm填充物(或具备雷同效力的色谱柱卡塔尔;b卡塔尔国流动相:流动相及梯度洗脱条件见表1;  c卡塔尔国流速:1.0
mL/min;  d卡塔尔(قطر‎柱温:30
℃;  e卡塔尔国检查评定波长:氯吡脲、烯效唑和脱落酸的最棒检查评定波长为258
nm,萘乙酸最好检查测量检验波长为280 nm;f卡塔尔进样体量:10
μL。  上述操作参数是天下无双的,可依据区别仪器特点对给定的操作参数做适当调节,以期获得最棒效果。规范的脱落酸、萘乙酸、氯吡脲、烯效唑标准溶液液相色谱图四、标准曲线的绘图  分别移取脱落酸、萘冰醋酸、氯吡脲、烯效唑混合规范溶液(4.8State of Qatar0.10
mL、0.20 mL、0.50 mL、0.80 mL、1.00 mL和2.00 mL至10
mL体量瓶中,乙酸乙酯(4.1State of Qatar定容,配制作而成浓度为10 mg/L、20 mg/L、50 mg/L、80
mg/L、100 mg/L、200
mg/L的混杂标准行事溶液。依据色谱条件(6.3.1State of Qatar浓度由低到高的顺序进行测定,以色谱峰峰面积为纵坐标,对应的浓淡为横坐标,绘制典型工作曲线。

本规范适用于水溶养料、复混化肥、掺混养料、配方养料中10栽种物生长调解剂[复硝酚钠(2-硝基丙酮钠、4-硝基环己酮钠、5硝基邻甲氧基丁酮钠State of Qatar、萘过氧乙酸、脱落酸、赤霉酸、氯吡脲、烯效唑、多效唑、2,4-D]的检查评定。
标准性引用文件 《GB/T 6682 解析实验室用水规范和尝试艺术》 一、相关仪器
1、液相色谱-串联质谱仪:配有电喷雾离子源和数量管理机。 2、漩涡混合器。
3、高速离心机:最高转速超级大于6000r/min。 4、解析天平:精度0.1mg。
5、金属试验筛:0.5mm。 6、超声波洗刷器。 7、有机相微孔滤膜:0.22μm。
二、质谱操作准则:
a卡塔尔电离格局:电喷雾电离,氯吡脲、烯效唑、多效唑选取正离子方式(ESI+State of Qatar,复硝酚钠、萘乙酸、脱落酸、赤霉酸、2,4-D采取负离子格局(ESI-卡塔尔;
b卡塔尔(قطر‎检查实验方法:多反应监测形式(MRM卡塔尔国; c卡塔尔国离子源温度:550 ℃;
dState of Qatar雾化气:氟气,流速8 mL/min; e卡塔尔气帘气:氧气,流速25 mL/min;
f卡塔尔国碰撞气:氢气;流速50 mL/min; gState of Qatar毛细管电压:22 V; 三、规范曲线的绘图
分别移取一文山会海混合标准工作溶液(4.18卡塔尔(قطر‎,依据浓度由低到高的一一依据仪器条件(6.3.1卡塔尔(قطر‎进行测定,以色谱峰峰面积为纵坐标,对应的标准溶液浓度为横坐标,绘制标准工作曲线。
四、定性
按6.3.1的仪器条件对行业内部行事溶液和样本溶液举办测定,假使样本溶液中色谱峰的保存时间与规范物质色谱峰的保留时间一成不变;并且样板溶液中监测离子的相对丰度比与一定浓度的规范溶液的监测离子没有错相对丰度比的谬误不超过表2的分明范围,则可看清样本中留存对应的靶子成分。

淫羊藿为小檗科植物,首要职能为补肾阳,强筋骨,除湿化痰。由此,淫羊藿甙在补肾壮阳的保健食物中常是任重(Ren Zhong卡塔尔(قطر‎而道远的机能因子。关于淫羊藿甙的测定,保养身体食物方面尚无查证方法,药典对其甙类的检查评定是薄层色谱法,需铺板,试样萃取,减少压力蒸馏浓缩,最后用分光光度法测定,既麻烦测量误差又大。所以本文利用高效液相色谱法对保护健康食物中淫羊藿甙的测定举办了探究。1
素材与办法1.1 仪器: Shimadzu
LC-6A高效液相色谱系统;SPD-6AV紫外检查实验器;C-普拉多2A数据管理种类;C18柱,CSF-3A超声波产生器。1.2
试剂: 标准溶液:精密称取淫羊藿甙标准品5.0
mg,用甲醛(优级纯卡塔尔溶解并定容为10.0 mL,此溶液浓度为0.5
mg/mL。该溶液用乙酸乙酯稀释5倍,即为0.1 mg/mL的正规使用液。2 仪器条件
流动相:甲缩醛+水;流速0.8 mL/min;检查测量试验波长270
nm,0.02AUFS。柱温40℃,流动相过0.45 nm滤膜。3 测定方法3.1
试样管理[6]:取破裂的固体试样4.0 g,参与百分之三十异甲缩醛40 mL,超声30
min后过滤。用少些百分之九十乙醇清洗残渣,搜罗滤液,定容至50
mL,为试样管理液。3.2 测定:取上述试样管理液1 mL,用百分之七十乙醇稀释至5
mL,过0.45μm滤膜,进样5μL,在上述仪器条件下深入分析,测定峰面积。
取标准应用液5μL,在长期以来色谱条件下解析,以相对保留时间定性,峰面积定量。3.3
计算x=(h1×C×V×5×100卡塔尔国/(h2×m卡塔尔 x试样中淫羊藿甙的含量,mg/100
g;h1试样峰高或峰面积;C标准溶液浓度,mg/mL;V试样定容体积,mL;h2标准溶液峰高或峰面积;m试样量,g。3.4
色谱图 4 结果与座谈4.1 波长的筛选对淫羊藿甙规范溶液,进行紫外线光谱扫描,其最大摄取波长为270
nm,由此筛选270 nm进行检查评定具有较高灵敏度。4.2 流动相称比的抉择
扩张流动相中甲缩醛的比例,会使出峰时间收缩,但出于保养食物成分复杂,为杀绝杂质烦扰,当流动相称比为55+45时,保留时间为12.45
min,淫羊藿甙峰的方圆无任何苦恼。如图所示。4.3
方法的线性范围及最小检出限 分别配制浓度为0.025,0.050,0.075,0.100,0.125
mg/mL淫羊藿甙规范溶液,在长久以来色谱条件下深入分析,以浓度对峰面积作校正曲线,得线性回归方程和相关周密分析为y=3822.399x+755,r=0.9999。本办法非常的小检出限为0.03μg。表1
精密度试验结果 n=6 mg/100 g试样号 1 2 3 4 5 6 奥德赛SD %1 0.0127 0.0123
0.0129 0.0121 0.0122 0.0127 0.0125 2.62 0.0091 0.0110 0.0101 0.0103
0.0105 0.0100 0.0102 6.23 0.0115 0.0116 0.0111 0.0113 0.0113 0.0114
0.0114 1.54.4 准确度
遵照试样测定步骤,做五个浓度加标回笼试验,每一种浓度做6个平行样,低浓度平均回笼率为97.8%~102.4%,高浓度平均回笼率为97.5%~101.8%。4.5
精密度 选用3种含淫羊藿甙的保养食物,分别测定6次,结果见表1。4.6
牢固性试验
从表2能够洞察出方法的上情下达相当好,那与淫羊藿甙自身化学属性相比稳固有关。表2
牢固性试验结果 第壹遍 第叁遍 第叁次 第六遍 本田UR-VDS %一九九九.4.20 1997.4.21
一九九九.4.22 一九九九.6.40 试样1 0.0127 0.0124 0.0126 0.0125 1.02花样2 0.0091
0.0101 0.0100 0.0091 5.7
由于此类保养食品,成分复杂,临时含有其余甙类、黄酮类、叶绿素、防腐剂等,本实验实行了空白试验,对未加淫羊藿甙的同种试样进行了上述办法的测定,结果无扰乱,见图谱。
5 结论
应用高效液相色谱法测定保养食品中的淫羊藿甙,方法简便,困扰少,精密度及精确度均较满足,有较强的实用性。

乳、乳制品及饲料中三聚氰胺的测定一.名词简单介绍1.三聚氰胺理化性质三聚氰胺:克罗地亚语名“melamine”,简单称谓三胺,学名三氨三嗪,别称蜜胺、氰尿酰胺、三聚酰胺。分子式:C3N6H6、C3N3(NH2State of Qatar3;分子量:126.12;物理品质:水泥灰结晶粉末,无害,没味;相对密度:1570kg/m³;熔点:在常压下,354℃降解;升华温度:300℃;溶解性:能溶于二甲醚、丙醛、乙酸、热乙二醇、甘油、吡啶;微溶于水、丙醛;不溶于乙醚、苯和四氯化碳,水溶液呈弱中性(neutrality卡塔尔国。化学属性:三聚氰胺是一种重大的氮杂环有机化学工业原料,显弱中性(neutrality卡塔尔国,能够与各样酸反应生成三聚氰胺盐;在强酸或强碱液中,三聚氰胺发生水解,胺基稳步被羟基替代,生成三聚氰酸二酰胺、三聚氰酸一酰胺和三聚氰酸;三聚氰胺与醛类反应生成加成化合物;三聚氰胺与乙醇反应制作而成树脂,三聚氰胺树脂是一种三种用场的质感,防火耐热且有相当高的安居,用于分娩塑料、地板砖,厨房用具,防火纤维,商业滤膜,胶水和阻燃剂。2.乳制品是指以新鲜牛乳及其产物为根本原材料,经加工而制作而成的各个食品。本标准所指的乳制品满含液体乳类、乳粉类、含乳果汁类、炼乳类、乳皮肪类、干酪类、乳冰棍类和别的乳制品类等。二.高效液相色谱法测定1.规律试样经溶解、超声提取、沉淀蛋白、过滤得到测验液,经高速液相色谱测定,依据保留时间和紫外吸取光谱定性,依据峰面积进行定量。2试剂方法中所用试剂,除另有明确外,均为分析纯试剂,水为GB/T6682-二〇〇九中超级用水,溶液为水溶液。2.1磺基水杨酸。2.2柠檬酸。2.3双环戊二烯磺酸钠:高效液相色谱离子对试剂。2.4氯化锂:色谱纯。2.5泛酸。2.660g/L磺基水杨酸:称取60g磺基水杨酸用水定容至1L。2.70.1mol/L盐酸:量取8.3mL乙酰胆碱用水稀释至1L。2.8缓冲液:柠檬酸和间戊二烯磺酸钠浓度均为10mmol/L。2.9三聚氰胺标准品:已知含量大于99%。2.10行业内部储备液:称取三聚氰胺标准品0.01g,用乙酸乙酯配制作而成浓度为1mg/mL标准储备液。2.11正规种类:将标准储备液用0.1mol/L泛酸逐级稀释至0.25g/mL,0.50g/mL,1.00g/mL,2.00g/mL,4.00g/mL,5.00g/mL,10.0g/mL的万户千门标准溶液。3仪器成套性3.1不慢液相色谱仪3.1.1P3000型高压输液泵3.1.2UV3000紫外线检查评定器3.1.3Rehodyne手动进样阀(20μl卡塔尔(قطر‎3.1.4CXTH3000色谱工作软件3.1.5ODS250mm×4.6mm,5m3.1.6解析运行工具包3.1.7溶剂龙船泡3.1.8试剂包3.1.9爱抚柱和柱芯3.1.10真空固相萃取装置3.2溶剂过滤器3.3超声波洗刷器3.4柱温箱3.5赶快离心机:转速》4000r/min3.6旋涡混匀器3.7解析天平:感量0.1mg4样本管理4.1固态乳制品称取1.0g左右试样,参预0.1mol/L烟酸约15mL,涡旋混匀,超声提取30min后步向60g/L磺基水杨酸6mL~8mL,用0.1mol/L乙酰胆碱定容至25mL,混匀后离心,上清液经0.45m的微孔滤膜过滤后进样。4.2液态乳制品称取15g左右情势,加入60g/L磺基水杨酸3mL~4mL,用0.1mol/L泛酸定容至25mL,混匀后离心,灵宝天尊液经0.45m的微孔滤膜过滤后进样。4.3饲料称取1.0g左右试样,将样板用研钵充足碾碎混匀,参与0.1mol/L烟酸约15mL,涡旋混匀,超声提取30min后参预60g/L磺基水杨酸6mL~8mL,用0.1mol/L烟酸定容至25mL,混匀后离心,上清液经0.45m的微孔滤膜过滤后进样。5测定步骤5.1色谱条件5.1.1色谱柱:ODS或C8,250mm×4.6mm,5m。5.1.2流动相:缓冲液︰氰化钠=85︰15。5.1.3流速:1.0mL/min。5.1.4柱温:40℃。5.1.5波长:240nm。上述色谱条件是第顶尖的,可依照实际情况做具体调解。要是分别效果不美貌,将水相改为:柠檬酸和环丁烷磺酸钠浓度均为10mmol/L,加3mL三氯冰醋酸,配制作而成1000mL溶液,流动相用氨水调PH值3.9到3.95。5.2测定5.2.1正式曲线制备将业内种类0.25g/mL,0.50g/mL,1.00g/mL,2.00g/mL,4.00g/mL,5.00g/mL,10.0g/mL分别进样20L,以峰面积为纵坐标,浓度为横坐标作图,制作专门的学业曲线。5.2.2样本测定取制备好的款型溶液进样20L,进行液相色谱分析。依照保留时间和紫外摄取光谱定性,遵照峰面积拓宽定量。三聚氰胺的标样色谱图见图1,液态奶样板色谱图见图2,奶粉样板色谱图见图3。图1标准样本色谱图仪器:莱茵河金普深入分析仪器有限公司LC3000色谱柱:安徽金普解析仪器有限集团ODS柱250mm×4.6mm,5μm流动相:缓冲液︰氯化铜=85︰15,用三氯乙酸调PH3.9流速:1.0mL/min柱温:40℃波长:240nm图2液态奶样本色谱图仪器:吉林金普剖判仪器有限公司LC3000色谱柱:广东金普解析仪器有限公司ODS柱250mm×4.6mm,5μm流动相:缓冲液︰氯化学物理=85︰15,用三氯过氧乙酸调PH3.9流速:1.0mL/min柱温:40℃波长:240nm图3奶粉样本色谱图仪器:湖北金普深入分析仪器有限公司LC3000色谱柱:湖北金普解析仪器有限集团ODS柱250mm×4.6mm,5μm流动相:缓冲液︰氯化物=85︰15,用三氯冰乙酸调PH3.9流速:1.0mL/min柱温:40℃波长:240nm6结果计算6.1计量试样中三聚氰胺的含量按式总结:C×VX=————………………………………………………m式中:X—样板中三聚氰胺含量,mg/kg;C—从正规曲线上得知的含量,g/mL;V—定容体量,mL;m—称样量,g。平行测定结果用算术平均值表示,结果保留肆个人有效数字。本文参照他事他说加以考察以下方式:HPLC-UV检查测验方法三聚氰胺在人生观的C18柱上保留很

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